纤维素酶菌种选育及发酵工艺/生产纤维素酶的菌种选育

日期:2023-06-13来源:保健食品人气: 我来评论


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  1. 日常我们听得比较多的应该i啊是纤维素,相信大家对纤维素这个词也并不陌生。但提起纤维素霉
  2. 纤维素酶菌种选育
  3. 发酵工艺

日常我们听得比较多的应该i啊是纤维素,相信大家对纤维素这个词也并不陌生。但提起纤维素霉

可能有部分读者不是特别的了解。你知道纤维素霉的菌种选育是如何进行的吗?下面小逼就带大家一起来了解一下吧!

纤维素酶菌种选育

菌种选育是纤维素酶出产的基础性事情,国内外很多专家举行了大量钻研,为了出产高质量的纤维素酶产物,王家林等(1996)在吸取国内外履历的底子上,先后引进了绿色木霉木10、绿色木霉Sn-91014、康氏木霉NT-15、黑曲霉XX-15A,在此基础上,接纳了紫外线、特定电磁波辐射、线性加速器,亚硝基胍等物理、化学的诱变要领,取得了高产菌株NT15-H、NT15-H1、XT-15H、XT-15H1。此中木霉NT-15H固体造就活气经轻工部食品质量监视检测中央南京站检测评释,滤纸活气为3670ug,C1-酶活气24460ug,Cx-酶活气1800ug,已经到达国际先辈程度。

此菌种在工厂化出产中机能稳固。张苓花等(1998)接纳康氏木霉W-925,J-931,经由浓度为2%硫酸二乙酯以及紫外线(15W、30cm、2min)复合诱变后,得到了产酶活性高的Wu-932菌种,该菌种CMC糖化力到达2975,滤纸糖酶活性为531,比启程菌W-925分别进步了100%以及81%。化工部饲料添加剂技能服务中心王成书等(1997)接纳该中央的里氏木霉A3先举行紫外线以及亚硝基胍复合诱变后,将处置惩罚过的胞子接种于纤维双层平板上,30℃造就5-8天,15℃安排7-10天,挑拣透明圈直径以及菌落直径对比大的单菌落举行三角瓶固态发酵再筛选,得到了产纤维素酶活气很高的里氏木霉91-3菌株。

纤维素酶菌种易退化,退化后其产酶力明显降低,其缘故原由大概有三个方面:①经诱变筛选的菌种产生回复突变。

②天然负突变。

③菌种长期低温斜面收藏,会在分生孢子上长出次生菌丝,而次生菌丝所形成的分生孢子生命力弱,这大概是菌种退化的重要缘故原由。为了制止纤维素酶菌种退化,张苓花等(1998)报导,接纳砂土管收藏菌种。行将过筛洗净的砂子与土以3:2比例混淆分装在试管内,用1kgcm2压力灭菌30分钟共三次,将欲生存的斜面菌种制备成1000ml胞子悬浮液,每一个砂土管注入0.5ml,摇匀,放入盛有无水CaCl2真空干燥器内生存。经测定,在所测的121天内,酶的活性根本稳定;酶活性降落50%的时间,由通例要领的60天延伸至160天,显着地缓解了菌种退化速率。

发酵工艺

纤维素酶的生产工艺重要有两种,即固体发酵以及液体发酵,其工艺如下:

1、影响产酶量以及活气的因素:

影响纤维素酶产量以及活气的因素许多,除了菌种外,另有造就温度、pH、水份、基质、造就时间等。这些因素不是伶仃的,而是互相联络的。张中良等(1997)接纳匀称计划Cl12(1210),以绿色木霉(T.ViriclePers.expr)为菌种,钻研了影响产纤维素酶的五大因素对产酶量以及活气的作用,以为基质粗纤维含量为40%、初始pH7.5、加水4倍、在26-31℃前提下造就45h可取得最大产酶量26mgg以及CMC酶活气20mgg·h。王成华等(1997)也钻研了其诱变筛选的里氏木霉91-3的产酶前提,结果表明该菌种以7:3的秸秆粉以及麦麸,另添加4%硫酸铵、0.4%磷酸二氢钾、0.1%硫酸镁为最佳培养基,28-32℃为相宜造就温度,30℃为最佳温度,4%为最佳接种量,96h达到发酵岑岭。张苓花等(1998)钻研了以康氏木霉W-925为启程菌,经诱变后得到的Wu-932纤维素酶高产菌的最佳发酵前提。

结果表明,以1:2的麦麸以及稻草粉为培养基,5%的接种量,稻草破坏均匀长度3-5mm,初始pH4-5,温度在28-35℃,发酵时间72h为最佳发酵前提。